Um microscópio eletrônico de varredura (SEM) é um microscópio de alta resolução que permite ver coisas pequenas com grande detalhamento. Esta é uma visão geral rápida sobre como tirar fotos de uma amostra usando um. Lembre-se de que o SEM é um equipamento muito delicado e deve ser usado com muito cuidado. No entanto, seguir essas etapas de perto quase garantirá que você não danificará seu microscópio. Existem também muitos outros recursos que não são discutidos neste artigo, mas este procedimento descreve como obter uma imagem básica.
Este artigo fornece instruções específicas para um microscópio JEOL JSM-6010LA. Qualquer microscópio JEOL terá controles extremamente semelhantes ao microscópio descrito nestas instruções. Os microscópios Hitachi também serão muito semelhantes, mas outras marcas, como a Zeiss, podem ter botões de controle em locais diferentes.
Passos
Etapa 1. Obtenha uma amostra preparada
Preparar uma amostra para microscopia eletrônica é um procedimento muito aprofundado por si só, portanto, para este procedimento, use uma amostra que foi preparada para você. Se uma amostra for preparada para SEM, ela precisará ter um tamanho apropriado e também uma superfície condutora. Como a amostra já foi preparada, este artigo presumirá que ela atenda a essas qualificações.
Etapa 2. Traga o SEM à pressão atmosférica para abrir a porta da amostra
Entenda que o SEM estará sempre ligado e a câmara de amostra sempre estará sob vácuo. Isso significa que a câmara estará completamente vazia de quaisquer moléculas de gás, de modo que os elétrons terão um caminho livre em direção à amostra. Pressione e segure o botão VENT até que pisque e você ouvirá um clique. O botão VENT continuará a piscar até que o ambiente na câmara atinja a pressão atmosférica. Quando o botão VENT ficar laranja sólido, isso significa que a câmara está na pressão atmosférica e você pode abrir a porta.
Etapa 3. Coloque as luvas
Isso é extremamente importante porque a câmara do SEM precisa ficar muito limpa!
- Usando as alças de cada lado da porta, deslize lentamente para fora da porta.
- Assim que a porta estiver aberta, segure cuidadosamente o suporte de amostra e deslize-o para a direita. Ele se soltará de suas ranhuras e agora você pode carregar sua amostra.
- Em cada um dos quatro cantos do suporte de amostra, existem dois parafusos de fixação que prendem a amostra no lugar. Afrouxe um pouco esses parafusos (meia volta da chave de fenda deve ser suficiente) e, em seguida, remova a amostra em branco do suporte.
- Você pode colocar a amostra em branco de lado por enquanto, mas certifique-se de colocá-la em um Kimwipe e não diretamente em uma escrivaninha ou mesa. Coloque sua amostra no suporte e aperte os parafusos.
- Quando sua amostra estiver no lugar, vá em frente e deslize o suporte de amostra de volta em suas ranhuras no estágio de amostra.
- Agora você pode fechar a porta empurrando-a de volta para a câmara.
Etapa 4. Enquanto mantém a porta fechada, pressione e segure o botão EVAC até que comece a piscar para colocar a câmara de volta sob vácuo
Você ouvirá cliques e, depois de um minuto ou mais, ouvirá as turbinas da bomba girando. Essas bombas removerão todas as partículas de gás da câmara e elevarão a pressão interna a cerca de 10 ^ -6 torr. Quando o botão EVAC brilha em verde sólido, isso significa que a câmara está no vácuo. Agora aguarde mais 5 minutos antes de continuar para a próxima etapa.
Etapa 5. Após os 5 minutos, você está pronto para ligar o feixe de elétrons e começar a tirar fotos
- Vá para o computador do SEM e o software do microscópio deve ser ligado. O botão verde no canto superior direito da tela dirá OFF, indicando que o feixe de elétrons está desligado. Clique nele para ligar o feixe e, em seguida, dirá ON.
- Em seguida, clique no botão ACB (contraste e brilho automáticos) e sua amostra deverá ficar à vista.
- Usando o botão de ampliação no painel de controle, amplie a ampliação desejada. É uma boa idéia focar em uma ampliação maior do que você deseja para a sua imagem, portanto, sua imagem ficará melhor quando você diminuir o zoom. Por exemplo, se você quiser uma imagem de 2, 500x, pode focar em cerca de 4, 000x.
- Depois de aumentar o zoom, use o botão de foco para colocar a imagem em foco.
Etapa 6. Ajuste a altura da amostra
Agora sua amostra está em foco, mas você pode notar que ela não parece tão boa quanto você esperava.
- Abaixo da imagem de sua amostra na tela do computador, você verá a distância de trabalho especificada como "WD x mm", onde x é um número geralmente em torno de 10-20. Anote este número.
- Para boas imagens, você pode usar uma distância de trabalho de 10 mm. Isso significa que o feixe está focado a 10 mm da lente. Para definir sua distância de trabalho, clique em "WD x mm" e um controle deslizante aparecerá, permitindo que você altere qualquer número x para 10. Vá em frente e clique em 10.
- Atualmente, a altura da amostra é Z = 25 mm. Para alterar a altura da amostra, você usará o botão Z. Esta parte pode ser complicada. Qualquer que seja a distância original de trabalho, subtraia 10 de is e é quanto você precisará para mover o botão Z. Por exemplo, se o seu WD era de 16 mm e você o alterou para 10 mm, você precisará mover o botão Z para baixo aproximadamente 6 mm. Portanto, você o ajustará para cerca de 19 mm.
- Enquanto você gira o botão Z, observe a tela porque ela começará a entrar em foco. Assim que estiver em foco, sua imagem estará pronta!
Etapa 7. Afaste o zoom até a ampliação desejada e, se quiser mover para outra área da amostra, pode usar os botões X e Y
Você também pode ajustar o contraste e o brilho de acordo com sua preferência. Quando encontrar uma área de que goste, tire uma foto clicando no ícone da câmera que diz "ARMAZENAR". Isso abrirá uma caixa de diálogo permitindo que você salve seu arquivo de imagem. Você pode nomear o arquivo como quiser e armazená-lo em qualquer pasta do computador ou em uma unidade flash.
Etapa 8. Desligue o feixe de elétrons clicando no botão verde que diz "ON" no canto superior direito
Certifique-se de que diz "OFF" antes de continuar. Gire os botões X, Y e Z para que cada valor seja 25 mm. Agora pressione e segure o botão VENT até que pisque para retornar a câmara de amostra à pressão atmosférica.
Etapa 9. Abra a câmara de amostra quando o botão VENT ficar laranja sólido
Depois de remover a amostra do suporte, coloque a amostra em branco de volta no suporte e deslize-a de volta para o estágio de amostra. Deslize a porta de volta para a posição fechada. Finalmente, pressione e segure o botão EVAC até que pisque. NUNCA deixe a câmara SEM ventilada, isso pode causar danos às peças internas. Assim que o botão EVAC brilhar em verde sólido, ele pode ser salvo para sair do SEM.
Avisos
- É muito importante usar luvas ao tocar em qualquer coisa que entre na câmara de amostra!
- Nunca deixe a câmara SEM ventilada. Se você sair do SEM, certifique-se de que o botão EVAC esteja brilhando em verde sólido.
- Se sua amostra não foi preparada especialmente para um SEM, não a coloque no microscópio! Algumas amostras simplesmente não aparecem bem, mas outras podem realmente causar danos às peças internas.
